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VDSpher 精睿/经典反相液相色谱分析柱
根据流动相和固定相相对极性不同,液相色谱分为正相色谱和反相色谱。流动相极性大于固定相极性的情况,称为反相色谱。非极性键合相色谱可作反相色谱,在现代液相色谱中应用最广泛,现代液相色谱分析工作的70%以上是在非极性键合固定相上进行的。
反相色谱是指利用非极性的反相介质为固定相,极性有机溶剂的水溶液为流动相,根据溶质极性(疏水性)的差别进行溶质分离与纯化的洗脱色谱法。反相色谱中溶质也通过疏水性相互作用分配于固定相表面,但是反相色谱固定相表面完全被非极性基团所覆盖,表现出强烈的疏水性。因此,必须用极性有机溶剂(如甲醇、乙腈等)或其水溶液进行溶质的洗脱分离。
溶质在反相介质上的分配系数取决于溶质的疏水性,一般疏水性越大,分配系数越大。当固定相一定时,可以通过调节流动相的组成调整溶质的分配系数。反相色谱主要应用于相对分子质量低于5000,特别是1000以下的非极性小分子物质的分析和纯化。
反相介质的商品种类繁多,其中最具代表性的是以硅胶为载体,通过表面键合非极性分子层制备。通过控制反应时间和温度,可获得性能稳定的反相介质。在硅胶基质的反相填料中,以键合有C18、C8、C4的球形多孔填料最为常见,用途最广。反相色谱固定相大多是硅胶表面键合疏水基团,基于样品中的不同组分和疏水基团之间疏水作用的不同而分离。
色谱柱是HPLC系统非常关键的一部分,随着色谱技术的发展,它也不断地更新换代,长度变得越来越短,填料颗粒也越来越细。现在常用的色谱柱长度在30~250 mm,颗粒直径在1.6~5μm。颗粒类型主要有全多孔和表面多孔,全多孔填料具有更大的柱容量、更多键合相选择的优点,表面多孔具有反压低、峰形好的优点。
目前最常用的基质是硅胶。以前填料纯化技术不是很成熟,十八烷基键合到硅胶表面不是很完全,硅胶上总是少量的硅羟基裸露在外面。这样就造成样品在进行色谱分离的时候,会吸附或者键合在这部分硅羟基上,导致色谱峰拖尾。使用三乙胺作为封尾剂,先行与硅羟基吸附,可以使峰型改善,这个三乙胺曾经一度成为分析界的宝贝和机密。现在制造填料的技术日趋成熟,人们已经掌握了把这部分剩余未键合硅胶也进行键合钝化的技术,这个技术就叫作封尾。
现在每家色谱柱的制造商都有其独特的键合技术,常规的键合基团有C18、C8、C4、苯基、氨基、氰基、硅胶等。C18和C8色谱柱是目前最常用、每个实验室必备的通用型色谱柱。填料是硅胶基质上键合十八烷基、辛烷基,有较高的碳含量和较好的疏水性,适用于大多数化合物,包括非极性、极性小分子及一些多肽及蛋白质。随着每家色谱柱制造商的研发,C18和C8柱的类型还在不断增加。适用pH范围由原来的2~8,发展到现在1~14,与纯水相的兼容性越来越好,某些色谱柱即使长时间使用100%水相,也不会发生填料疏水塌陷。对于每位实验人员来说,可供选择的范围日趋广泛。
德国VDS Optilab色谱技术公司是具有31年开发和生产液相色谱柱经验的企业,特别是运用反相液相色谱分离小分子化合物,产品品种和优化的选择更全面。用于小分子化合物色谱分离的C18固定相种类有9种、C8固定相种类有9种,按照硅胶纯度不同,区分VDSpher(经典)和VDSpher PUR(精睿)两大系列,是同类产品线领域中最全供应商之一。
VDSpher 经典/精睿反相液相色谱填料
1、反相液相色谱填料种类:
反相液相色谱填料 |
反相液相色谱填料键合类型 |
端基封尾技术 |
C18-E |
Monomeric bonding(单分子层键合) |
Liquid phase endcapping(封尾) |
C18-SE |
Monomeric bonding(单分子层键合) |
Gas phase endcapping(全封尾) |
C18-M |
Polymeric bonding(聚合物层键合) |
no endcapping(不封尾) |
C18-M-E |
Polymeric bonding(聚合物层键合) |
Liquid phase endcapping(封尾) |
C18-M-SE |
Polymeric bonding(聚合物层键合) |
Gas phase endcapping(全封尾) |
C18-H |
Monomeric bonding(单层键合) |
Polar spacer(极性官能团嵌入) |
C18-NE |
Monomeric bonding(单分子层键合) |
no endcapping(不封尾) |
OptiAqua C18 |
Monomeric bonding(单分子层键合) |
special polar endcapping(独特封端) |
OptiAqua C18 LL |
Monomeric bonding(单分子层键合) |
special polar endcapping(独特封端) |
C8-E |
Monomeric bonding(单分子层键合) |
Liquid phase endcapping(封尾) |
C8-SE |
Monomeric bonding(单分子层键合) |
Gas phase endcapping(全封尾) |
C8-M |
Polymeric bonding(聚合物层键合) |
no endcapping(不封尾) |
C8-M-II |
Polymeric bonding(聚合物层键合) |
no endcapping(不封尾) |
C8-M-E |
Polymeric bonding(聚合物层键合) |
Liquid phase endcapping(封尾) |
C8-M-SE |
Polymeric bonding(聚合物层键合) |
Gas phase endcapping(全封尾) |
C8-H |
Monomeric bonding(单层键合) |
Polar spacer(极性官能团嵌入) |
C8-NE |
Monomeric bonding(单分子层键合) |
no endcapping(不封尾) |
C8-SB |
Monomeric bonding(单分子层键合) |
Gas phase endcapping(全封尾) |
C4-E |
Monomeric bonding(单分子层键合) |
Liquid phase endcapping(封尾) |
C4-SE |
Monomeric bonding(单分子层键合) |
Gas phase endcapping(全封尾) |
Phenyl-E |
Monomeric bonding(单分子层键合) |
Liquid phase endcapping(封尾) |
Phenyl-SE |
Monomeric bonding(单分子层键合) |
Gas phase endcapping(全封尾) |
Phenyl-B |
Polymeric bonding(聚合物层键合) |
Liquid phase endcapping(封尾) |
CN-RP |
Monomeric bonding(单分子层键合) |
Liquid phase endcapping(封尾) |
CN-SE-RP |
Monomeric bonding(单分子层键合) |
Gas phase endcapping(全封尾) |
2、C18液相色谱填料性能-高柱效:120,000/m,当今常规反相C18液相色谱柱最高柱效的代表。